保留指数（RI）值作为一个重要的辅助定性指标，能够极大地提高化合物识别的可信度。在GC/ID软件中，保留指数的计算不需要借助使用正构烷烃混标，利用Cerno公司开发的自动校准保留指数（AutoRI）的新方法，通过样品数据自校正的方式计算出每个峰的保留指数值。

　　AutoRI计算保留指数，在保留指数线性曲线良好的情况下，其测定保留指数RI的准确性很高，可与使用正构烷烃的外标校准法相媲美。

香叶油样品中未知成分的鉴定

　　香叶油样品直接GC/MS进样，GC/MS为Agilent 5977，分离色谱柱为DB-1（60 m x 320 μm x 0.5 μm ）。

　　香叶油挥发性组分的TIC图见图1.

图1：香叶油样品挥发性组分的TIC图

　　GC/MS数据分析由GC/ID 5.0软件完成，如图2所示，在GC/ID软件中调用香叶油样品数据，然后自动运行即可。

图2：在GC/ID中运行AutoRI

　　1. GC/ID分析结果

　　GC/ID运行结束后，我们可以直接查看该数据的自校正保留指数曲线，如图3所示。结果表明，保留指数线性良好，可以用于样品保留指数的计算。

图3：样品的自校正保留指数曲线

　　GC/ID的分析结果将显示在一个可编辑审查的报告中，如图4所示，每个保留时间峰的鉴定结果都显示了峰的保留指数。

图4：GC/ID的分析结果报告

　　在GC/ID报告中，我们可以查看任一峰的详细NIST检索和保留指数结果，如图5所示为保留时间Rt=30.411min峰的鉴定结果。结合NIST正、反检索和保留指数匹配值RI_Fit，我们可以确定该峰为Linalool。

图5：Rt=30.411min峰的NIST匹配候选结果

　　选中列表中的Linalool结果行，我们可以查看它的更详细的鉴定结果，如图6所示，其校正计算的保留指数为1081.6，谱库收录的保留指数为1086，偏差为4.4（匹配度RI_Fit=95.6）。

图6：Linalool的鉴定详细信息

　　2. NIST谱库检索匹配接近候选化合物的识别

　　Rt=31.269min的峰，NIST检索结果如图7所示，NIST正反检索匹配度最高的为第7个化合物，CAS#: 3033-23-6，但其保留指数RI_Fi值仅为59.2，这意味着实测保留指数与谱库理论保留指数偏差为41.8。NIST匹配度第二高的化合物在结果表中的第6行，CAS#: 5258-11-7，其保留指数RI_Fi值80.2。NIST匹配度第三的化合物为CAS#: 16409-43-1，其保留指数匹配最佳，RI_Fit为99.8。

　　这三个化合物的NIST匹配度很近似，如果只是看匹配度，我们很难区分这两个同分异构体。但是保留指数RI_Fi值很好地帮我们区分了它们。

图7：Rt=31.269min峰的NIST匹配候选结果

　　3. 共流出峰的解卷积分析

　　GC/ID自带解卷积功能，可对共流出峰中的混合物进行解卷积运算，并自动给出各个组分的鉴定结果。我们在该样品中发现了一些共流出峰，GC/ID对其都有很好的分析结果。

　　如图8所示，在保留时间55.5min的峰中，GC/ID给出了混合物的分析结果，并在TIC图中进行混合峰的颜色标记（粉色）。结果表明，该峰位置存在两个组分，解卷积后的保留时间分别为55.53min和55.59min，鉴定结果分别为CAS#: 10219-75-7和CAS#: 17066-67-0，分子式均为C15H24，保留指数的匹配值RI_Fit分别为99.9和95.2。

图7：GC/ID对Rt=55.5min峰的解卷积分析计鉴定结果

　　图8：Rt=55.53min峰的解卷积后的质谱图

　　图9：Rt=55.59min峰的解卷积后的质谱图

　　4.小结

　　GC/ID软件中将正向检索和反向检索、保留指数（RI）相结合，能够显著提高通过GC/MS技术鉴定未知化合物的准确性和可信度。

　　色谱共流出峰也能通过GC/ID的解卷积分析得到很好的鉴定。

　　在很多情况下，通过利用样品分析中那些检索结果置信度高且与保留指数趋势线高度相关的化合物（自动保留指数校准，AutoRI），可以省去为获取保留指数数据而对GC进行精确校准的额外工作。

　　关于MassWorks GC / ID V5.0

　　GC/ID 是由 Cerno Bioscience 公司开发的一款革命性的 GC/MS 全自动数据处理软件，用于定性和半定量分析。2024 年，GC/ID V5.0 版本正式更新和发布，它将是功能最强大、最容易使用、最独立于 GC/MS 制造商的解决方案！

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