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使用ISOLUTE®MYCO提取谷物中多种霉菌毒素,然后LC-MS/MS分析

关键词:ISOLUTE®MYCO、提取、谷物、多种霉菌毒素、LC-MS/MS分析、蒸发
时间:2016-12-08 17:17:59

粮食作物的真菌霉菌产生了有毒代谢产物就是霉菌毒素,法规和立法部门建立测试霉菌毒素污染物方法,适于测试普遍存在的各种粮食作物的霉菌毒素。本文介绍了LC-MS/MS分析粮食作物的真菌毒素的佳前处理SPE固相萃取方法。

该应用方法所有相关的霉菌毒素,在不同谷物基质中从% RSD到LOQs低定量限,都可以得到高回收率,并且符合欧洲粮食作物霉菌毒素法规分析要求。

ISOLUTE® Myco固相萃取柱提供了皮实、可靠的大部分食品多霉菌毒素类的样品制备方法。使用一个单一的,易于使用的样品制备产品,加上优化的基质特定应用于说明,科学家可以制备不同的食品/作物样品,再进行LCMSMS分析。

分析目标物
黄曲霉毒素B1(AB1),黄曲霉毒素B2(AB2),黄曲霉毒素G1(AG1),黄曲霉毒素G2,麦角隐亭(ECO)、麦角考宁(ECY),赭曲霉毒素A(OTA)、伏马菌素B1(FB1),玉米赤霉烯酮(ZON),T-2毒素,HT-2毒素


样品制备步骤
选择柱子:ISOLUTE Myco 60mg/ 3mL柱(Tabless)货号:150-0006-BG
样品预处理:1. 样品处理:研磨样品(小麦好或玉米或大麦,50g),室温下密封容器存放。
2.萃取:20mL50%乙腈(aq)与研磨好的5g全谷物(或面粉)混合,振动台上30分钟,将提取液转移到50毫升的离心机管,离心机3000g(转速)10分钟
3.稀释:取上清液8mL转移到新的50mL离心管,并用32mL水稀释,离心机3000g离心稀释后提取物10分钟。


固相萃取
全程流速是1mL/min
活化:2mL已经活化柱子
平衡:2mL水平衡柱子
上样:装载3mL预处理的样品,流速大1mL/min,建议重力载样
干扰物清洗1:3mL水清洗柱子
干扰物清洗2:3mL10%乙腈清洗柱子
干燥:大真空干燥柱子30秒
洗脱1 :2mL0.1% 甲酸乙腈溶液洗脱
洗脱2:2mL甲醇洗脱
后洗脱:合并洗脱液,使用SPE Dry(35 °C, 20-40 L/min)的空气或氮气流干燥或TurboVap LV (15 bar,35 °C ,40分钟)
用0.1%醋酸于20%乙腈:甲醇(1mL,1:1,v/v)进行稀释。分析之前使用0.2µm聚四氟乙烯膜注射器过滤器过滤。
液相色谱:Shimadzu Nexera UHPLC,色谱柱:Kinetex XB-C18 50 x 2.1 mm 2.6 µm dp (Phenomenex, Macclesfield UK)
液质仪器:AB Sciex ,5500三重四极杆液质,离子源:Turbo-V ESI


订货信息
货号:150-0006-BG ISOLUTE Myco 60 mg/3 mL柱((Tabless),数量:50个
货号:121-1016 VacMaster-10样品处理歧管整套带有16mm收集架子 ,数量:1个
货号:121-2016 VacMaster-20样品处理歧管整套带有16mm收集架子 ,数量:1个
货号:C103198 TurboVap LV, 110V 数量 : 1个
货号:C103199 TurboVap LV, 220V 数量 : 1个

来源于:Application Note AN782 ©Biotage (谷物中多种霉菌毒素萃取)Extraction of Multiple Mycotoxins From Grain Using ISOLUTE® Myco prior to LC-MS/MS Analysis

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