在工业空气监测中，测定羰基（醛和酮）排放量对预防呼吸、肺病、自身免疫疾病和癌症起到至关重要。 根据DIN ISO 16000-3中描述的分析方法，羰基必须用2,4-二硝基苯肼（DNPH）转化为其相应的腙，以便通过UV检测器检测并通过反相HPLC分析。

Knauer诺尔液相解决方案

KNAUER AZURA HPLC plus 二元高压梯度液相色谱系统，结合KNUAER自主的Eurospher II 100-3 DNPH色谱柱 ，参考DIN ISO 16000-3方法开发了一套完整的空气中醛酮化合物的HPLC分析解决方案，可准确地对13种醛酮化合物进行定性定量分析。

AZURA HPLC plus  和 Eurospher II 100-3 DNPH色谱柱

3D立方体选项的色谱建模软件

优化HPLC中方法主要目的是为皮实、、可重复、合适的分析条件。为了节省资源，计算机辅助开发方法是有价值的工具。为了表征空气样品中的羰基含量，通常使用13种醛和酮DNPH衍生物的标准混合物。为了分析，必须实现所有13个组件的良好分离。在这里，使用具有3D立方体选项的色谱建模软件来优化碳酰基标准混合物的分析。对梯度时间、温度、三元洗脱液组成的影响进行优化，此外，在计算机上研究了方法的可靠性，并通过实验得到了高度一致的验证。

 13种羰基的色谱图，用DNPH柱按 DIN ISO 16000-3法测定（优化前）

根据DIN ISO 16000-3的方法，仅能获得11个色谱峰（见图），丁烯醛-DNPH、2-丁酮-DNPH、甲基丙烯醛-DNPH、正丁醛-DNPH分离度不佳。

为了优化加快方法优化，本方案使用了色谱模拟软件进行快速的方法优化。将所得的色谱图输入优化软件，软件给出方法优化建议，并根据软件优化结果建立新的分离方案。

图色谱模拟软件给出的方法操作设计区域

12红尖测量条件

优化后的方法如下：

流动相：A：双蒸水；B：乙腈

梯度：0~16min（60% A + 40% B）→ 30~40min（40% A + 60% B）→ 41min（60% A + 40% B）→ 45min（60% A +40% B）

流速：1ml/min

柱温：22℃

进样体积：10µL

检测波长：360nm

优化后分离效果如图所示。

13种羰基（醛酮）化合物的标准色谱图（优化后）

表 13种羰基（醛酮）化合物保留时间表